脯氨酸（PRO）检测试剂盒后结果如何计算

脯氨酸(PRO)检测试剂盒后结果如何计算

产品说明：

脯氨酸(Pro)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内 Pro 含量显 著增加。Pro 增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此， 脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。 用磺基水杨酸（SA）提取 Pro，加热处理后，Pro 与酸性茚三酮溶液反应生成红色；加甲苯萃 取后，在 520nm 测定吸光度。

样品测定的准备：
1、细胞、细菌或组织样品的制备 ：
细菌或细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，弃上清；按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，
超声波破碎细菌或细胞（功率 20％，超声 3 秒，间隔 10 秒，重复 30 次），之后置沸水浴振荡提取
10min；10000g，常温离心 10min，取上清，冷却后待测。
组织：称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆；之后置沸水浴振荡提取 10min，10000g，
常温离心 10min，取上清，冷却后待测。
2、血清（浆）样品：取 100µL 血清（浆）加入 0.9mL 提取液，充分混匀，之后置沸水浴振荡提取
10 分钟，10000g，常温离心 10 分钟，取上清，冷却后待测。
3、标准品的处理：称取 1mg，将标准品稀释为 15、10、8、6、4、2、1、0 µg/ml。

计算方法；
1、通过标准曲线计算样品脯氨酸含量(y 为脯氨酸含量，µg/mL；x 为 OD 值)
2、按照细菌、细胞个数或者组织鲜重计算，首先根据标准曲线求得 y 值：
细胞或细菌中脯氨酸含量(µg/104 cell)= y÷细胞浓度(104 cell/mL)
Pro 含量(µg/g mass) =y÷样本鲜重(g/mL)
3、血清（浆）中脯氨酸含量，首先根据标准曲线求得 y 值：
Pro 含量[µg/mL 血清（浆）] = y÷0.1mL 血清（浆）/mL
注意：提取液中含有蛋白沉淀剂，提取的上清液不能用于蛋白浓度的测定

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