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兔抗伤寒杆菌O血清试验方法

更新时间:2024-07-05 点击量:52

兔抗伤寒杆菌O血清实验方法


别名:兔抗伤寒杆菌O(H)血清;兔抗伤寒杆菌O(H)免疫血清(抗血清)

本品是由伤寒杆菌O (H)抗原免疫家兔获得的抗伤寒杆菌O(H)血清抗体,与伤寒杆菌O (H)抗原37℃水浴箱18小时测得效价。


试验方法:

1.取清洁小试管8支,依次编号。

2.于小试管内各注入0. 5ml生理盐水。

3.于第一管内加入1: 10 稀释的抗O (H)血清0.5ml,用1ml吸管吹吸三次,混匀,吸出0.5ml注入第二管作对倍稀释,...依次稀释至第7管,弃去0.5ml,8管为对照。

4.各管内注入伤寒杆菌O (H)菌液0.5ml;

5.加完菌液后,振荡试管架,混匀,放置37°C水浴箱18小时后观察结果。

快速检测法:(H抗原抗体反应)置于50℃水浴箱2-4小时结果,但其效价要比过夜观察低1-2个滴度。

[结果与分析]

先观察对照管,正确结果应无凝集现象,再观察各试验管的凝集现象,

凝集程度以+"多少表示之。

(++++ )最强,上液澄清,细菌全部凝集沉淀于管底。

(+++)强,上液轻度混浊, 细菌大部分凝集沉淀于管底。.

(+)弱,上液混浊,细菌少部分凝集。

(-)不凝,液体呈乳状与对照管相同。

效价判定: 以能出现"+"凝集现象的血清最高稀释度为该血清的凝集效价。即第 1~7孔的血清最终稀释度分别为1:401:80, 1:160, 1:320,1:6401:1280, 1:2560

【注意事项】

1) 所有的生物试剂或者化学试剂理应被认为具有潜在危害,应妥善保管于合适的实验室内,严禁存放于住宅、宿舍等生活场所。严禁非专业人员或儿童接触,以免造成不必要的伤害。 

2) 推荐只有经过良好实验室培训的专业人员方可进行操作。操作时请佩戴合适的实验防护设施,例如实验服、实验口罩、一次性实验手套、防护面罩等。不要用身体任何部位或者皮肤与之直接接触。严禁吞食。 

3) 在操作时严禁用嘴吹吸;移液和振荡时,小心谨慎,避免液体飞溅。 

4)使用完成后,不得随意丢弃。请按照实验室废弃化学品处理规定,进行妥善处理。