注:所有产品仅供科研使用,不能用于食用和医疗等
本产品仅供科研实验,不得用于医疗或食用
南京信帆生物技术有限公司主营生物试剂和销售--- | |||||||
大鼠促性腺激素释放激素ELISA试剂盒 | |||||||
此ELISA试剂盒的英文名称是--- | |||||||
Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA kit | |||||||
规格: | 96T/48T | ||||||
我们的elisa试剂盒具有如下优点: | |||||||
一、高效、灵敏、特异的抗体; | |||||||
二、稳定的重复性和可靠性; | |||||||
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; | |||||||
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; | |||||||
五、性价比非常好,节省实验经费。 | |||||||
ELISA技术原理:以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底 | |||||||
物的高效催化作用相结合起来 | |||||||
1. 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。 | |||||||
2. 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。 | |||||||
3. 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。 | |||||||
4. 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记 的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。 | |||||||
5. 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。 | |||||||
6. 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量 与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定 性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重复性好。 | |||||||
我们采用的酶: | 辣根过氧化酶(HRP) | ||||||
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。 | |||||||
2. 是一种糖蛋白,含糖量约18%;分子量为44kD。 | |||||||
3. 是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合 而成的一种卟啉蛋白质。 | |||||||
4. 主酶为无色糖蛋白,在275nm波长处有zui高吸收峰;辅基是深 棕色的含铁卟啉环,在403nm波长处有zui高吸收峰。 | |||||||
HRP催化下列反应: | |||||||
DH2+H2O2<==hrp==>D+2H2O | |||||||
上式中DH2为供氢体,H2O2为受氢体。HRP对受氢体的专一 性很高,除H2O2外,仅作用于小分子醇的过氧化物和尿素的过 氧化物。后者为固体,作为试剂较H2O2方便。许多化合物可作 为HRP的供氢体,在ELISA中常用的供氢体底物为邻苯二胺(orthopenylenediamine,OPD)、四甲基联苯胺(3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS[2,2'-azino- bis(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-6)]。 | |||||||
大鼠促性腺激素释放激素ELISA试剂盒 | |||||||
Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA kit | |||||||
测定步骤 | |||||||
1.加样 | |||||||
1. 除包被外都需45度加样 | |||||||
2.加样体积要准确 | |||||||
3.管底加样,不能加在管壁上 | |||||||
4.加样时不能产生气泡 | |||||||
2.温浴 | |||||||
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。 | |||||||
2.各ELISA板不应叠在一起。 | |||||||
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。 | |||||||
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。 | |||||||
3.洗涤 | |||||||
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。 | |||||||
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。 | |||||||
4.读板 | |||||||
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。 | |||||||
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。 | |||||||