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重组牛肠激酶(rb-EK)适用于基因工程融合蛋白的酶切。

更新时间:2022-12-21 点击量:330

重组牛肠激酶(rb-EK)适用于基因工程融合蛋白的酶切。


相关介绍:

肠激酶(EC 3.4.21.9)是一种丝氨-酸蛋白水解酶,能高效专一地识别蛋白质中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK)序列,并在赖氨酸(Lys,K)的C端水解肽键,产生切割,在生物体内水解胰蛋白-酶原转变为胰蛋白-酶,由于肠激酶具有高度专一性和高效酶切特性,广泛应用于基因工程产品的开发。


天然肠激酶由1条115 kDa的重链和1 条35 kDa的轻链组成,重链起锚定细胞膜的作用,轻链具有全酶完整的催化活性。本产品采用大肠杆菌分泌表达牛肠激酶的轻链活性核心区域(235A.A., 26.2 kDa),比活性更高,特别适用于基因工程融合蛋白的酶切。


品    名:重组牛肠激酶(Recombinant Bovine Enterokinase, rb-EK)

规    格:200 U(液体),1000 U(液体),100 μg

产品形式:液体为1 U/μl rb-EK, 50 mM Tris-HCl, 50%甘油, pH 8.0;冻干粉冻干前为50 mM Tris-HCl(pH 8.0)酶溶液

分 子 量:26.2 kDa(SDS-PAGE检测约为30 kDa)

等 电 点:5.20

比 活 性:≥40000 U/mg,即1 mg rb-EK至少切割2000 mg融合蛋白。

纯    度:≥95%(SDS-PAGE检测)

A280nm(1 mg/mL):2.06

内 毒 素:≤5 EU/mg

来    源:大肠杆菌

保存条件:-20℃保存

活性定义:25℃,反应缓冲液为50 mM Tris-HCl (pH 8.0),底物为50 μg 1 mg/ml含酶切位点的融合蛋白,16 h内切割95%的融合蛋白所需的酶量为1个酶活力单位(1 U)。


注意事项:

1)一些试剂会影响酶的活性,如 >2 M Urea,>250 mM NaCl,>20 mM β-ME,>0.1% SDS,>50 mM Imidazole。样品中如果含有这些成分,需要透析至50 mM Tris-HCl (pH 8.0)。

2)磷酸盐会抑制肠激酶的活性,应避免使用磷酸盐缓冲液作为酶切体系。

3)本产品仅限于科研使用。