Heinz小体染色液使用技巧
变性珠蛋白小体又称为血红蛋白包涵体,实际上是一种变性血红蛋白颗粒,一般附着在细胞膜上。多发生在敏感个体服用药物或接触化学物质后,这些药物可导致Hb 变性。该包涵体也可见于某些不稳定的Hb 患者,因此对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症以及不稳定Hb 病有一定的确定意义。该染色液染色后,呈蓝黑色小点。该染色液仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
血红蛋白的四级结构对其运氧功能有重要意义。它能从肺携带氧经由动脉血运送给组织,又能携带组织代谢所产生的二氧化碳经静脉血送到肺再排出体外。现知它的这种功能与其亚基结构的两种状态有关,在缺氧的地方(如静脉血中)亚基处于钳制状态,使氧不能与血红素结合,所以在需氧组织里可以快速地脱下氧;在含氧丰富的肺里,亚基结构呈松弛状态,使氧极易与血红素结合,从而迅速地将氧运载走。亚基结构的转换使呼吸功能高效进行。
结晶紫法
(1)吸取1小滴结晶紫液于洁净玻片上,加血液1滴,使其与染料混匀,覆盖玻片,5分钟后用油镜检查。
(2)或取结晶紫盐水液0.5ml,置于小试管中加末梢血(或静脉血)3-5滴,混匀,置37℃水浴5分钟后,取出1滴于玻片上,加盖玻片后用油镜观察结果。
(3)计数1000个红细胞,记录Heinz小体阳性的红细胞数,以百分率报告结果。
构成
血红蛋白是高等生物体内负责运载氧的一种蛋白质。人体内的血红蛋白由四个亚基构成,分别为两个α亚基和两个β亚基,在与人体环境相似的电解质溶液中血红蛋白的四个亚基可以自动组装成α2β2的形态。血红蛋白的每个亚基由一条肽链和一个血红素分子构成,肽链在生理条件下会盘绕折叠成球形,把血红素分子抱在里面,这条肽链盘绕成的球形结构又被称为珠蛋白。血红素分子是一个具有卟啉结构的小分子,在卟啉分子中心,由卟啉中四个吡咯环上的氮原子与一个亚铁离子配位结合,珠蛋白肽链中第8位的一个氨酸残基中的吲哚侧链上的氮原子从卟啉分子平面的上方与亚铁离子配位结合,当血红蛋白不与氧结合的时候,有一个水分子从卟啉环下方与亚铁离子配位结合,而当血红蛋白载氧的时候,就由氧分子顶替水的位置。