信帆生物人NK细胞扩增试剂盒使用详情

信帆生物人NK细胞扩增试剂盒使用详情

NK细胞是人体免疫的第壹道防线，具有非限制性杀伤的特点，如何发挥NK细胞的免疫作用从而治疗肿瘤等疾病是一个重要的课题。因为NK细胞仅占外周血的5-10%，细胞数量的往往是制约研究的一个重要原因。本产品 用于从单个核细胞（MNC）在体外扩增成NK细胞，具有扩增效率高，目的细胞百分比高的特点，起始单个核细胞经过14天培养，总细胞数可以扩增约50倍左右， NK细胞数可以扩增500倍以上，且纯度高于90%。

产品特点

   1 扩增效率高： 50M个起始单个核细胞经过14天培养，总细胞数可以扩增约50倍左右， NK细胞数可以扩增500度以上，且纯度高于90%； 

   2 目的细胞百分比高：NK细胞纯度可达到90%以 上； 

   3 *无血清培养：适用于临床研究。

 使用说明

   1. D0 将制备好的单个核细胞（MNC）按1M cells/mL细胞密度铺于T-75瓶中，加入NK-IV培养基45mL， NK-I 125μL， NK-II 5mL， NK-III 250mg （500mg/支用1mL培养液溶解，可用于2套NK细胞扩增试剂盒）以及 IL-2 1000U/mL；

   2. D4 补加90ml NK-IV培养基（含IL-2 1000U/mL）， NK-II 10mL，转入细胞培养袋，此时袋子含150mL培养基;

   3. D6 往培养袋补加135mL NK-IV培养基(含IL-2 1000U/mL)， NK-II 15mL，此时袋子含300mL培养液;

   4. D8 往培养袋补加270mL NK-IV培养基(含 IL-2 1000U/mL)， NK-II 30mL，分成两袋，每个袋子含300mL培养液;

   5. D10 往每个培养袋补加280mL NK-IV培养基(含IL-2 1000U/mL)， NK-II 20mL，此时每个袋子含600mL培养液;

   6. D12 每个培养袋补加400mL NK-IV 培养基(含 IL-2 1000U/mL)，此时每个袋子含1000mL培养液;

   7. D15 收获NK细胞，总细胞数扩增40±15倍，目的细胞数NK细胞(CD3-CD16+CD56+)扩增500-1000倍，细胞纯度为80±15%。 

产品保存

   1 本产品需避光保存；

   2 NK-I， NK-III， NK-IV置于2-8°C保存，有效期为12个月， NK-II置于-20°C保存，有效期为24个月；

   3 请于保质期内使用本产品，超过保质期，请勿使用；

   4 为确保本产品的质量，请避免对其反复冻融。 

  培养效果

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