上海信帆-兔抗卵清蛋白（抗血清）抗原的制备流程

上海信帆-兔抗卵清蛋白（抗血清）抗原的制备流程

抗血清copy也称高免血清，指将处于高度免疫状态下的动物（自然感染某病原体发病后耐过而恢复健康的动物，或健康动bai物经连续几次接种疫苗而体内产生高滴度抗体的动物）进行采血后分离到的含抗体滴度较高的血清。这类抗血清可du用于特异性动物疫病的紧急预防和紧急治疗，由于其直接增加机体内的抗体含量，故产生的防治zhi效果快而显著。但因其不能刺激机体继续产生抗体，故dao在体内维持时间不长，免疫期较短，但对发病早期的动物疗效显著。

抗原制备

1）抗原稀释：用灭菌生理盐水将抗原稀释为2mg/ml，于免疫前一天加入溶液，使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI，链霉素1000 UI，放4℃过夜（一般可不加青、链霉素）次日取出，与佐剂混合制成乳剂后用于动物免疫。

佐剂和抗原乳剂的配制：佐剂的配制：福氏*佐剂（Freund’s complete adjuvant），各实验室的配方不尽相同

3、免疫途径，剂量和免疫周期：抗原注射途径可根据不同抗原及试验要求，选用皮内、皮下、肌肉、静脉或淋巴结内等不同途径注入抗原进行免疫。一般常采用背部、足掌·耳后等处皮内或皮下多点注射。初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2～4周。

试血，测定抗体效价：一般在第三次免疫后7～10天即可于兔耳静脉或小鼠尾尖取少量血，分离出血清之后进行试血。

放血：经效价检查合格后即可放血。放血前动物应停食12 h，以减少血清中的脂肪含量。如拟保留该免疫动物，可直接由心脏取血，或切开耳缘静脉滴血或心脏穿刺取血。取血后由静脉缓缓注入等量5%葡萄溶液以补足失血量。

分离血清：必须在无菌条件下进行，待收集于平皿或三角瓶内的血液凝固之后，用无菌滴管在无菌环境（例如超净工作台）中把xue块与瓶壁剥离后，放入37℃，1～2h取出后放入4℃过夜，使血清充分析出（不能冰冻，否则产生溶血），经离心沉淀分出血清，放进低温冰箱保存。使用前必须经过签定合格后再分装保存备用。

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