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小鼠促生长激素释放激素（GHRH)elisa 试剂盒*，买二送一！
生长激素释放激素（GHRH）由下丘脑弓状核神经元合成并释放入垂体门脉系统后，与垂体生长激素细胞表面的生长激素释放激素图册生长激素释放激素受体（GHRHR）结合后,活化非选择性离子通道,使细胞膜去极化,促进钙离子内流和GH分泌.本药盒利用人血清中样品GHRH与其示踪物125I-GHRH与特异性GHRH抗体竞争结合反应，形成125I-GHRH-GHRHAb;GHRH-GHRHAb复合物，加入（IgG）分离剂。利用分离剂分离出复合物，并测定复合物中的放射性计数。通过数据处理求出样品中GHRH的浓度。本药盒为定性测定，用血量少，直接加样，操作简便，快速。
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实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠促生长激素释放激素（GHRH）水平。用纯化的小鼠促生长激素释放激素（GHRH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促生长激素释放激素（GHRH），再与HRP标记的促生长激素释放激素（GHRH）抗 体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的促生长激素释放激素（GHRH）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标 准曲线计算样品中小鼠促生长激素释放激素（GHRH）浓度。
操作步骤：
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
48ug/L 5 号标准品 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
24ug/L 4 号标准品 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
12ug/L 3 号标准品 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
6ug/L 2 号标准品 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
3ug/L 1 号标准品 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl， 然后再加待测样品 10µl（样品终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
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4.配液：将 2 0 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 2 0 倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
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