髓过氧化物酶（MPO）检测试剂盒测定原理！

髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒测定原理！

测定原理：

中性白细胞中存在有髓过氧化物酶 ，每个细胞中所含的酶的量是一定的，约占细胞干重的 5%，该酶具有使过氧化氢还原的能力，利用这一特点可以分析酶的活力，并定量测定中性白细胞的数目。其原理如下：

MPO+H2O2→复合物；复合物+AH2(供氢体) →H2O+MPO+A 产物

通过供氢体邻连茴香胺供氢后生物试剂黄色化合物，在 460nm 处通过比色测定 A 产物的生成量，从而推算出 MPO 的活力以及 H2O2 减少的量和白细胞的数目。

试剂组成与配制：（100T/48 样）
试剂一：缓冲贮备液 35ml X 1 瓶，4℃保存 6 个月
缓冲应用液的配制： 贮备液：双蒸水=1:9，按需要量配制，4℃保存 1 个月。
试剂二： 粉剂 X2 支，4℃保存 6 个月。临用时每支加缓冲应用液 60ml 溶解，可以 37℃加热溶解，
4℃保存 2 周。
【注】若您所需测的是组织样本，并且除髓过氧化物酶之外，还需测其他项目时，此时每支试剂二粉
剂需配成浓缩一倍的溶液，即每支试剂二粉剂加到缓冲应用液 30ml 中。
试剂三： 粉剂 X3 支，溶剂 6mlX3 支，4℃保存 6 个月。用时 1 支粉剂倒入 1 支溶剂中溶解，
提前一天配制，充分溶解后 4℃保存 2 周。
试剂四：溶液 24mlX1 瓶，天冷时会凝固。用前放入 37℃以上的水中摇晃使其溶解至透明后方可应
用，室温保存 6 个月。
试剂五：粉剂 X2 支，4℃保存 6 个月。
试剂六：溶液 0.5mlX1 支，4℃保存 6 个月。
显色剂的配制：临用时将试剂五粉剂 1 支加到 100ml 缓冲应用液中，充分摇匀，待粉剂*溶
解后再加入试剂六 0.1ml，充分混匀，配制好的显色剂 4℃避光保存。
试剂七：溶液 6ml X1 支，4℃保存 6 个月。

髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒测定原理！

二．组织样本的 MPO 测定
（一）、样本前处理
1.准确称取组织重量，以配制好的试剂二溶液为匀浆介质，按重量体积比为 1:19 加匀浆介质
制备成 5%的组织匀浆，不需要进行离心。
【注】：若您除做髓过氧化物酶之外，还需要测其他指标时，则组织匀浆制备要按下面方法：

1.试剂二配制时要浓缩一倍，即每支试剂二粉剂加到 30ml 缓冲应用液中；

2.先用生理盐水为匀浆介质按实验方法学制成浓缩一倍的匀浆，即 10%匀浆（脑组织制备成 20%匀
浆），不要离心，取出部分浓缩一倍匀浆按 1:1 比例加入浓缩一倍的试剂二溶液，混匀后再进行测定。

3.取 5%组织匀浆 0.9ml 加 3 号试剂 0.1ml，（如果组织匀浆量不够，可以按 9:1 的比例减少组织匀浆及 3 号试剂的用量），充分混匀后 37℃水浴 15 分钟，取出后待测。

注 1： 天冷时，反应液会出现凝固状态，吸光度上升，您可以用 25 - 37℃水浴箱或取一个盛 25 - 37℃热水的烧杯放在比色机旁边，将各待测管一次放入水浴箱或烧杯中 1 - 2 分钟，待凝固消失后即可进行比色。

注 2：混匀时，用漩涡混匀器，使液体上下充分混匀（一定要使zui下面液体也能旋转到上面，建议不要用尖底的管子做，尤其不可用 1.5ml 的 EP 管，因为这样非常难混匀）

髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒测定原理！