人抗鼠抗体（HAMA）定性检测试剂盒真的太棒了！

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使用目的
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗鼠抗体(HAMA)表达。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗鼠抗体(HAMA)表达。用纯化的人抗鼠抗体
(HAMA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中抗鼠抗体(HAMA)相结合，经洗涤除
去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的抗鼠抗体(HAMA)抗体结合，形成抗体-抗原- 酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，
并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），与
CUTOFF 值相比较，从而判定标本中人抗鼠抗体(HAMA)的存在与否。

标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

人抗鼠抗体(HAMA)定性检测试剂盒真的太棒了！

操作步骤
1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1
孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先
加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不
触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。

计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为抗鼠抗体(HAMA)阴性
阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为抗鼠抗体(HAMA)阳性

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