人Ⅰ型胶原交联C末端肽（ICTP）elisa试剂盒操作步骤

人Ⅰ型胶原交联C末端肽(ICTP)elisa试剂盒基本信息

胶原蛋白是大分子蛋白质，其分子量在30万以上，并不能被人体直接吸收。食入含胶原蛋白的食物必须经消化道蛋白酶分解成单纯的小分子氨基酸，才能被肠道吸收利用，再经过机体复杂的生物化学反应，合成人体需要的胶原蛋白，供给各组织器官的需要。由二个或二个以上氨基酸组成--蛋白肽。人体的吸收是以肽的方式进行，食用蛋白肽的吸收利用率可达100%。肽的分子量、氨基酸排列顺序不同所表现的功能就不同。胶原蛋白富含人体需要的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸等氨基酸。胶原蛋白是细胞外基质中zui重要的组成部分。胶原蛋白肽是一种细胞外蛋白质，它是曲3条肽链拧成螺旋形的纤维状蛋白质，胶原蛋白是人体内含量zui丰富的蛋白质，占全身总蛋白质的1/3。一个60kg的成年人的身体内约有3公斤胶原蛋白，主要存在于人体皮肤、骨骼、眼睛、牙齿、肌腱、内脏（包括心、胃、肠、血管）等部位，其功能是维持皮肤和组织器官的形态和结构，也是修复各损伤组织的重要原料物质。在人体皮肤成分中，有70%是由胶原蛋白所组成。

人Ⅰ型胶原交联C末端肽(ICTP)elisa试剂盒操作步骤

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。

2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。

3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

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