海藻糖含量检测试剂盒说明书

海藻糖含量检测试剂盒说明书

规格:100T/96S

产品内容：
提取液：液体100ml×1 瓶，4℃保存；
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存；
标准品：粉剂×1 支，含10mg 海藻糖。

产品简介：
海藻糖存在于大量有机体中，包括细菌、藻类、酵母、植物、昆虫和其他无脊椎动物。由于海
藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物学特性，能在干旱、高温、脱水、冷冻、高渗透压及
毒性物质等恶劣环境下保护生物体细胞蛋白质、脂肪、糖类、核酸等组分不受损害。
测定方法采用蒽酮比色法。具有简便快捷﹑适用于微量样品的测定等优点。但是蒽酮比色法也
存在一定缺陷，如果样本中含有可溶性糖，则会影响测定。本试剂盒建议用于除海藻糖外不含其他
可溶性糖样本的测定。

操作步骤：

一、海藻糖提取：

1、细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500 万细菌或细胞加入
1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％或200w，超声3 秒，间隔10 秒，重复30 次），
室温静置45min，振荡3~5 次，冷却后，8000g，常温离心10min，取上清。

2、组织的处理：称取约0.1g 样本，加入1mL 提取液，冰浴匀浆或研碎，室温静置45min，振荡3~5
次，冷却后，8000g，常温离心10min，取上清。

3、血清（浆）的处理：吸取约100μL 血清（浆），加入1mL 提取液，充分混匀，室温静置45min，
振荡3~5 次，冷却后，8000g，常温离心，取上清。

4、标准品的处理：标准品用1ml 双蒸水溶解，溶液浓度为10mg/ml，稀释到0.1、0.08、0.06、0.04、
0.02、0mg/ml。

二、测定操作表：

1、分光光度计或酶标仪预热30min，波长调节至620nm，蒸馏水调零。调节水浴锅至95℃。

2、工作液的配制：临用前在每瓶试剂一中加入7mL 蒸馏水后，缓慢加入28mL 浓硫酸，不断搅拌，
充分溶解，待用。用不完的试剂4℃保存一周。

3、标准曲线的建立：取60l 标准液和240l 现配的工作液混匀，95℃水浴10 min，（盖紧，防止
水分散失）自然冷却至室温，取200l 至比色皿或酶标板中，在620nm 处测吸光值A。根据标
准样本的浓度（y）和吸光度（x）建立标准曲线。

4、样本测定：取60l 样本和240l 现配的工作液混匀，95℃水浴10 min，（盖紧，防止水分散失）
自然冷却至室温，取200l 至比色皿或酶标板中，在620 nm 波长下测定吸光度值为A。
若吸光值大于1，请将样本用提取液适当稀释。zui后计算时乘以相应的稀释倍数。