链霉亲和素-琼脂糖凝胶FF(易洗脱型)纯化过程

信帆生物主营产品: 质控品，干扰物质，抗体抗原，elisa试剂盒，动物血制品，生化试剂盒等。实验代做服务：HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR）、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等

链霉亲和素-琼脂糖凝胶FF(易洗脱型)

（Easy Elution Streptavidin-Berpharose FF ）

1.产品介绍

链霉亲和素琼脂糖凝胶FF（易洗脱型）是一种将链霉亲和素（ee）键合在琼脂糖凝胶微球上形成的亲和层析分离介质，利用生物素与链霉亲和素配体之间的相互作用分离纯化生物素或生物素化的抗原、抗体、核酸等物质。

本产品与普通的链霉亲和素-琼脂糖凝胶FF相比，优势在于可以在温和条件下解离洗脱生物素化物质，而不必再使用变性条件洗脱，从而能够更好的保持纯化样本的活性，增加填料的使用寿命。               

2.纯化流程

①缓冲液：

结合缓冲液：20mM NaH2PO4、 150mM NaCl、pH7.4

洗脱缓冲液： 1-5mM D-生物素

②样品准备：

上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处理样品。并且上柱前应过0.45μm滤膜或高速离心去除不溶物。

③样品纯化：

（1）装柱、平衡：取适量的填料装入合适的层析柱中，用结合缓冲液平衡5个柱体积，建议流速为100cm/h。

（2）上样：将准备好的样品缓慢上柱，为保证样品与链霉亲和素充分结合，应控制好上样流速，建议流速为15-50cm/h。

（3）淋洗：上样后用结合缓冲液平衡10个柱体积以上，或平衡至基线，洗去杂质，推荐流速为100cm/h。

（4）竞争性洗脱：用洗脱缓冲液洗脱抗体，收集洗脱峰，建议流速为100cm/h。

（5）清洗：洗脱后的柱子应用结合缓冲液平衡，并用20%乙醇保存柱子，于4-8度保存。

3.注意事项

1) 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，影响纯化效果。

2) 去除一些沉淀或变性物质，建议使用下面的方法用2倍柱体积的0.1M NaOH溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质3-4倍柱体积70%乙醇或2倍柱体积的1% TritonX-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH 7.4清洗。

3) 本产品保存条件为20%乙醇，4-8℃。

4) 2-25℃，常压，避光运输。

5) 仅供科研实验使用。