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ELISA检测试剂盒的优点和操作注意事项

更新时间:2023-09-07      浏览次数:464

 ELISA检测试剂盒的优点和操作注意事项

ELISA就是酶联免疫吸附测定,是免疫学当中的经典试验,是将可溶性的抗原或者是抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合,进行免疫反应的定性和定量检测方法。

ELISA在抗体药物研发的各个环节有着广泛的应用,从应用目的来说可以分为两类:

生物大分子的定量:体内抗体药物的药代动力学,药效生物标志物的含量检测等。

亲和力测定评价或者筛选:杂交瘤的滴度测定,噬菌体展示的筛选,抗体和细胞表面受体的亲和力评价等。

ELISA的优点如下:

灵敏度高:酶活性放大ELISA中,检测的灵敏度远比RIA高。

特异性强:由于作用检测指示剂的酶与其底物的反应有专一性,从而增加了该方法的特异性。

对仪器设备要求不高:测定成本低,在普通实验室便可进行。

ELISA在抗体药物研发的各个环节有着广泛的应用,从应用目的来说可以分为两类:

物大分子的定量:体内抗体药物的药代动力学,药效生物标志物的含量检测等。

亲和力测定评价或者筛选:杂交瘤的滴度测定,噬菌体展示的筛选,抗体和细胞表面受体的亲和力评价等。

ELISA操作注意事项:

试剂盒的选择:选择适合自己检测范围和灵敏度的试剂盒。

样本处理:收集标本前需有一个完整的计划,需要清楚要检测的成分是否足够稳定,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4°C备用。

防止反复冻融:标准品的倍比稀释应事先做好准备。

规范操作:注意操作规范,枪头勿刮划预包被的孔底。

及时检测:提取后应尽快进行试验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融。