辛基-琼脂糖凝胶FF预装柱方法
相关介绍:
辛基-琼脂糖凝胶FF是一种将辛基键合在琼脂糖微球上形成的中等疏水性疏水层析分离介质。该产品保留了琼脂糖的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有离子交换容量高,非特异性吸附少,流速快等特点,广泛用于具有一定疏水性能的蛋白质、多肽等生物大分子实验室规模制备和生物制药、生物工程的工业化制备。
典型应用如重组人粒巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、人集落刺激因子(M-CSF)、表皮生成因子(EGF)、生长激素(GH)的生产以及单克隆抗体的纯化
品 名:辛基-琼脂糖凝胶FF
英文名:Octyl NUPharose Fast Flow, Octyl NUPharose FF
规 格:20 ml,100 ml,1L,1 ml预装柱
运 输:2 ~ 25℃,常压、避光
贮 存:20%乙醇,2 ~ 25℃
使用方法:
1.1 根据分离目标性质配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。
1.2 将凝胶抽干,并用蒸馏水洗涤2次去除保存的乙醇,用蒸馏水配成匀浆并脱气。
1.3 将层析柱垂直固定,底端用水或缓冲液润湿并保持一段液位。
1.4 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,使凝胶在柱内自由沉降。
1.5 连结好柱子顶端活动柱头,打开蠕动泵,让缓冲液用使用时操作流速流过5柱体积,再使用1.5倍的操作流速流过5柱体积,调节适配柱头,使其尽量贴近胶面,最后用2 ~ 3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
注意:
1)所有操作过程不能引入气泡,保证装胶的均匀度。
2)如无条件做1.2,填料层有气泡,可进行2次装柱,去除保存的乙醇和气泡。
3)乙醇等试剂配制的溶液需要脱气。