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蛋白酶抑制剂混合物A(100X)使用方法

更新时间:2022-11-09      浏览次数:1112

蛋白酶抑制剂混合物A(100X)使用方法


蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)从广义上指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白变性的物质。从放线菌发酵液中分离到亮肽素、抗痛素、糜蛋白酶抑素、抑弹性蛋白酶醛、抑胃蛋白酶素、磷酰胺素等,能分别抑制胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、胃蛋白酶、金属蛋白酶等各种蛋白酶。都属于蛋白酶抑制剂。


使用方法

 A: 非磷酸化蛋白的提取:在使用前数分钟内向WB Super RIPA裂解液中,加入蛋白酶抑制剂混合物A (S0142),使其终浓度为1×。如250μl WB Super RIPA裂解液,加入2.5μl蛋白酶抑制剂混合物A,混合均匀,进行后续样品裂解和蛋白提取。

B: 磷酸化蛋白的提取:在使用前数分钟内向WB Super RIPA裂解液中,加入蛋白酶抑制剂混合物A 、磷酸酶抑制剂混合物B 、磷酸酶抑制剂混合物C (S0143)各2.5μl,使其终浓度为1×。如250μl WB Super RIPA裂解液,加入2.5μl蛋白酶抑制剂混合物A、2.5μl磷酸酶抑制剂混合物B 、2.5μl磷酸酶抑制剂混合物C,混合均匀,进行后续样品裂解和蛋白提取 。


蛋白酶是人类免疫缺陷病毒基因编码中的一种特异天冬酰蛋白酶,其作用是将基因和基因表达所产生的蛋白裂解,成为具有活性的病毒结构蛋白和酶,是HⅣ病毒复制的关键物质。蛋白酶抑制剂是一种治疗艾滋病的化学同类药物。


蛋白酶抑制剂是90年代中后期的新产品,药物合成工艺难度大,也是导致抗HⅣ治疗费用居高不下的主要原因,被称为"必须跨越壁垒"。蛋白酶抑制剂主要有:奈非那韦、沙奎邦韦、茚地那韦、安泼那韦、利托那韦、洛匹那韦及复合制剂。

是基于肽类的化合物,它们或竞争性抑制蛋白酶活性或作为互补蛋白酶活性点的抑制剂。这类药物能抑制蛋白酶的活性,其主要作用于艾滋病病毒复制的后阶段,由于蛋白酶被抑制,使之从感染的CD4细胞核中形成DNA不能聚集和释放。