酵母氮源培养基使用注意事项

酵母氮源培养基使用注意事项

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有水、氮源、无机盐（包括微量元素）、碳源、生长因子（维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等）等。

Yeast Nitrogen Base ( YNB)即酵母氮源基础，由氮源、微量元素、维生素及无机盐等复配而成，主要为酵母菌（包括酿酒酵母菌和毕赤酵母菌）培养提供无氨基氮源和生长因子。主要用于配制营养缺陷型筛选培养基和表达培养基，用于酵母菌的营养缺陷型筛选培养和表达培养，如配制SD筛选培养基、RD培养基、MD培养基、MM培养基、MG培养基等。

配制方法：

（一）单独配制YNB

1.称取6.7 g YNB加纯水至1 L，搅拌溶解，为1×YNB溶液，溶液澄清呈无色至淡黄色，常温pH 5.4±0.2@25℃；

2.称取67 g YNB加纯水至1 L，搅拌溶解，为10×YNB溶液，溶液澄清呈黄色。

（二）配制培养基

1. 称取6.7 g YNB（毕赤酵母一般为13.4 g/L），以及相应量的碳源、氨基酸、琼脂或其它补充营养成分，混匀，pH调至所需（多为5.8），121℃高压灭菌15分钟。

2. 也可配制10×YNB溶液，0.2 μm孔径滤器过滤除菌，以保证生物-素在内有机物避免高压灭菌遭到破坏，培养基的其它成分（预调pH值）高压灭菌后冷却至60 ℃加入10×YNB溶液。

注意事项：

1.YNB成分比较复杂，多为易吸潮的盐分，称取完后已及时旋紧瓶盖，并置于干燥避光处储存。严重结块后应废弃不再使用。

2.YNB（PM2070）配制10×溶液，溶解速度较慢，如需加快溶解速度，可加入适量盐酸加快溶解，待*溶解后，再用氢氧化钠调至合适pH值。

培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，均改制成粉末。