羟脯氨酸（HYP）含量检测试剂盒多种样本，皆可操作

羟脯氨酸(HYP)含量检测试剂盒多种样本，皆可操作

羟脯氨酸(hydroxyproline，HYP)是亚氨基酸之一，是一种非必需氨基酸，是胶原组织的主要成分之一，且为胶原中*的氨基酸，约占胶原氨基酸总量的13%。胶原蛋白是体内含量多的蛋白质，约占人体蛋白质总量1/3。利用羟脯氨酸在胶原蛋白中含量高这一特点，通过血液和尿液对羟脯氨酸的测定，可了解体内胶原蛋白分解代谢情况，即可作为结缔组织分解情况指标。很多疾病可伴有胶原代谢变化而引起血、尿及组织羟脯氨酸的含量改变。目前临床检验普遍使用氨基酸自动分析仪效果满意，此外还有比色法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等。

产品说明：
HYP 是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此 HYP
含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。

样品经水解产生游离的 HYP，进一步被氯胺 T 氧化，氧化产物与对二甲氨基苯甲全反应，产生
红色化合物，在 560nm 处有特征吸收峰。通过测定样品水解液 560nm 吸光值，可计算 HYP 含量。

操作步骤：
一、羟脯氨酸提取：
1、组织：称取约 0.2g 样品于玻璃管，将组织尽量剪碎以便消化，盖子稍松不密闭。加入 2mL 的提
取液，煮沸或 110℃烘箱 2 至 6 小时消化至没有可见大的团块，16000rpm，25℃，离心20min（若离心后仍有杂质，可通过过滤去除），用 10mol/L NaOH（约 1mL）调节 pH 值至 6～8 范围内。蒸馏水定容至 4mL，取上清待测。（过程中可能有黑色物质生成，若长时间不能消化，可能为碳化的物质）
2. 细胞：取500万个细胞，加入1mL的提取液，煮沸或110℃烘箱2至6小时消化至透明状，16000rpm，25℃，离心 20min，用 10mol/L NaOH（约 0.5mL）调节 pH 值至 6～8 范围内。蒸馏水定容至 2mL，取上清待测。

注意事项：
1、 OD 值大于 1.0，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
2、 试剂有一定的毒性，请操作时做好防护措施，防止吸入或与皮肤接触。
3、 按样本蛋白浓度计算时，需单独提取样本中的蛋白质并测定。